Wykrywanie endotoksyn bakteryjnych
Oferujemy usługi w zakresie badań endotoksyn bakteryjnych. Nasze metody badawcze spełniają wszystkie wymagania farmakopei (USP85, ChP1143), w tym testy żelowe-endotoksyny skrzepu TAL i LAL. Naszym klientom zapewniamy również eksperymenty sprawdzające zakłócenia i usługi wsparcia technicznego.
Badanie aseptyczne
Metody bezpośredniej inokulacji i filtracji membranowej to klasyczne testy sterylności produktów, mające na celu zapewnienie braku żywych mikroorganizmów zanieczyszczających. Testy te przeprowadza się w izolatorze lub pomieszczeniu czystym. Nasze metody badawcze spełniają wszystkie wymagania farmakopei (USP71, ChP1101).
• Próbki testowe inokuluje się bezpośrednio na dwa podłoża hodowlane w celu wykrycia mikroorganizmów tlenowych i beztlenowych.
• Po zaszczepieniu obydwa podłoża inkubuje się przez 14 dni. Przeprowadza się obserwację przerywaną i obserwację końcową na koniec okresu badania w celu wykrycia dowodów wzrostu drobnoustrojów.
• sterylne, zamknięte urządzenie filtracyjne umożliwia jednoczesne przefiltrowanie równych objętości badanych próbek przez dwa filtry membranowe.
• Próbki inkubuje się w dwóch podłożach hodowlanych przez 14 dni, aby ułatwić wykrycie mikroorganizmów tlenowych i beztlenowych.
Badanie na mykoplazmę
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest częstym problemem w hodowlach komórkowych. Sprawę dodatkowo komplikuje fakt, że zanieczyszczenia mogą osiągać wysokie miano, nie wykazując zmętnienia ani efektów cytopatycznych, co szczególnie utrudnia wykrywanie. Substraty komórkowe stosowane w produkcji biofarmaceutycznej muszą być wolne od czynników przypadkowych, w tym mykoplazmy. Testy na mykoplazmę należy przeprowadzać na wszystkich etapach rozwoju produktu, w tym na surowcach, bankach komórek, zapasach nasion wirusa, nieprzetworzonych materiałach zebranych masowo i produktach końcowych.
Metoda hodowli bezpośredniej
Próbki testowe wysiewa się bezpośrednio na płytki agarowe/pożywki półpłynne i płynne.
Udowodniono, że wybrane podłoża agarowe/pół-płynne i płynne mają dobre właściwości-wspomagające wzrost, wspierające wzrost wielu gatunków mykoplazm.
Każdy test na wykrywanie mykoplazmy obejmuje kontrolę ujemną i pozytywną w celu sprawdzenia przydatności systemu testowego.
W okresie inkubacji płynne hodowle są przeprowadzane w wielu punktach czasowych w celu obserwacji wzrostu mykoplazmy.
Pod koniec okresu inkubacji ocenia się zanieczyszczenie mykoplazmą, obserwując obecność kolonii mykoplazmy na płytkach agarowych lub zmianę koloru płynnego podłoża.
Całkowity okres inkubacji wynosi 28 dni.
Metoda hodowli komórek wskaźnikowych
Niektóre szczepy mykoplazmy są uważane za „nienadające się do hodowli”, ponieważ nie rosną w standardowych pożywkach hodowlanych. Do wzbogacenia tych szczepów mykoplazmy można zastosować hodowle komórek Vero. Po-tygodniowym okresie hodowli komórki utrwala się, barwi barwnikami fluorescencyjnymi-wiążącymi DNA i ocenia pod mikroskopem.
W przypadku zakażenia mykoplazmą, gdy zanieczyszczenie jest poważne, na powierzchni komórki i jej otoczeniu pojawia się charakterystyczny wzór jasnej fluorescencji.
Produkty białkowe, peptydowe, wektorowe i plazmidowe są szczególnie wrażliwe na czynniki środowiskowe. Badania stabilności służą do oceny działania produktów biofarmaceutycznych w różnych warunkach środowiskowych w określonym przedziale czasowym. Wyniki określają zalecane warunki przechowywania i transportu leków i produktów oraz określają odpowiedni-okres przydatności do spożycia lub okresy ponownego testowania.
Testy stabilności-w czasie rzeczywistym i przyspieszone
Okres ważności jest zwykle szacowany na podstawie wyników-testów stabilności w czasie rzeczywistym i przyspieszonych testów stabilności. Podczas testów stabilności-w czasie rzeczywistym produkt jest przechowywany w zalecanych warunkach i stale monitorowany, aż do momentu, w którym nie spełnia specyfikacji produktu. W przyspieszonych badaniach stabilności produkt jest przechowywany w warunkach podwyższonego stresu (np. podwyższona temperatura i/lub wilgotność). Następnie można przewidzieć degradację w zalecanych warunkach przechowywania, korzystając ze znanej zależności między współczynnikiem przyspieszenia a szybkością profili degradacji.
Badania wymuszonej degradacji
Badania wymuszonej degradacji przeprowadza się poprzez badania stabilności w ekstremalnych warunkach przechowywania, aby przyspieszyć tempo degradacji. Ze względu na nie-liniowy charakter kinetyki degradacji białek badania te mają ograniczoną wartość predykcyjną dotyczącą okresu trwałości produktów biofarmaceutycznych. Jednakże badania wymuszonej degradacji są szczególnie przydatne na-wczesnym etapie opracowywania leków, ponieważ dostarczają informacji na temat rozkładu produktu i ścieżek degradacji, umożliwiając optymalizację receptury i pomagając w określeniu warunków przechowywania w celu kontrolowania stabilności produktu.
Długoterminowe-badania stabilności
W przypadku produktów biofarmaceutycznych badania-stabilności długoterminowej przeprowadza się w oczekiwanych warunkach przechowywania, natomiast badania-krótkoterminowe przeprowadza się w wyższych temperaturach w celu potwierdzenia-oceny stabilności podczas użytkowania oraz w warunkach transportu.